丁 洲,王万鹏,谢富洋,濮 娟,刘艳艳

目的：研究源自GFP转基因C57BL/6雄性小鼠唾液腺的单克隆成体干细胞在修复放射性唾液腺损伤中的效果，并从局部组织再生和全身免疫调节的角度揭示其潜在机制。方法：通过结合组织块酶消化和差速贴壁的方法，分离供体小鼠的唾液腺细胞，然后运用有限稀释技术，建立出单克隆细胞系。利用流式细胞术识别干细胞的表面特征标识（CD49f和c-Kit双阳性）。设计了一种模型，通过给雌性C57BL/6小鼠的头颈部进行15Gy X线单次照射，诱导唾液腺损伤。然后将GFP⁺单克隆成体干细胞原位移植到受损腺体。在移植后的第1天、第7天和第30天，通过测定唾液流量、分析淀粉酶活性以及进行组织学染色（包括HE染色、PAS染色和PCNA免疫组化）来评估修复效果。通过测量脾脏/胸腺指数量、进行脾淋巴细胞的增殖实验、分析外周血中的淋巴细胞亚群、检测血清中的细胞因子以及分析脾脏中与免疫有关的转录因子的表达，来评估整体免疫调节的效果。结果：成功分离并验证唾液腺中具有自我再生能力的成熟干细胞。在移植后30天内，接受干细胞治疗的小鼠，其唾液流量和淀粉酶活性显著改善（P<0.05），而对照组的这些指标并未恢复正常。组织学分析结果表明：移植组的腺体结构损伤有所减轻，增殖细胞核抗原（PCNA）阳性的细胞数量显著提高，以及过碘酸雪夫（PAS）染色阳性腺泡的比例有所增加。研究结果显示，干细胞移植能够明显提高照射小鼠的胸腺指数和脾脏指数（P<0.05），促进脾淋巴细胞的增殖，调节外周血中CD4⁺/CD8⁺T细胞的比例，显著下降血清中的促炎细胞因子（IL-1β、IL-6、IFN-γ）浓度（P<0.05），并提升脾脏免疫调节性转录因子GATA-3的表达水平。结论：来自唾液腺的单克隆成体干细胞能够显著改善放射性唾液腺损伤，可能通过促进局部腺体再生和调节全身免疫稳态共同发挥作用。

源自唾液腺的细胞；放射性损伤；细胞移植；免疫调节；GFP小鼠

[1] 黄桂林.放射性唾液腺功能损伤的再生医学研究——从干细胞到无细胞治疗[J].口腔颌面外科杂志,2022,32(2):71-76. [2] Cui Tianning,Zhang Nini,Long Yuanzhu,Huang Guilin,Zhang Ligang,Tang Jianhong,Luo Qinliang.Study on Exosomes from Hypoxia- Preconditioned Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells for Repairing Radiation Damage in Salivary Glands[J].Journal Oral Medicine Research,2022,38(12):1145-1150. [3] Maimaitituerxun Abudunaibi,Rezeiye Maimaitizunong,Xu Hui.Progress in Research on Stem Cell Therapy for Radiation-Induced Damage to Salivary Glands[J].Journal of Clinical Stomatology,2023,39(12):759-762. [4] Wang Bo,Mu Yabing,Zang Guangxiang.Progress in Research on Salivary Glands and Salivary Gland Tumor Organoids[J].Chinese Journal of Stomatology,2022,57(5):535-539. [5] Jiang Jin,Zhang Songling,Zhao Shuya,Feng Guoxing,Fan Saijun.Study on the Protective Effects and Mechanisms of Trehalose on Radiation-Induced Intestinal Injury in Mice[J].International Journal of Radiation Medicine and Nuclear Medicine,2024,48(4):244-256. [6] 白瀚哲,王丹,倪蕾,代雨鑫,王畅,商宇,杨玉.齐墩果酸对小鼠肠道免疫功能损伤的修复作用[J].牡丹江医学院学报,2023,44(3):5-8. [7] 安璐.丝素蛋折/壳聚糖支架结合脂肪来源干细胞对放射性皮肤损伤的修复作用及机制探讨[D].苏州大学,2022. [8] Zheng Jiachen,Yang Entong,Zhu Yizhou,Liu Fang.Adult stem cells from different germ layers repair peripheral nerve injury[J].Chinese Journal of Tissue Engineering Research,2025,29(19):4102-4110.

点击下载PDF